苯是广泛存在的工业毒物和环境污染物，具有明确的血液毒性和遗传毒性。该项目旨在探讨苯毒性的表观遗传机制。该项目采用体内和体外相结合的研究手段，对全基因组甲基化、苯毒性相关基因、印迹基因以及对精子活力的影响进行了探讨。(1)在小鼠苯的亚慢性动式吸入毒性实验中，低剂量组(1ppm，系美国职业苯限定标准，相当于中国职业标准的二分之一)和高剂量组(100ppm)均出现血液参数改变，表明动物模型构建成功。(2)HPLC法检测骨髓细胞全基因组甲基化水平，结果未见各组差别有统计学意义，但染毒组DNA甲基化转移酶(DNMTs)的表达却显著下降、凋亡细胞比例明显增加，课题组认为苯介导的DNMTs的表达下调是细胞周期依赖的。(3)苯暴露能明显下调抑癌基因p15、p16的表达，但未见对p53、N-ras、c-myc、Rabl、Ape1等癌症相关基因表达的影响；经重亚硫酸盐测序PCR(BSP)分析，p15、p16、N-ras、c-myc基因启动子CpG岛所有CpG位点均呈非甲基化状态。(4)亚慢性染毒小鼠肝脏代谢酶Cyp2e1、Gstm1和Gstt1表达下降，BSP和焦磷酸测序显示Cyp2e1基因启动子的甲基化率增高，提示苯亚慢性暴露介导了Cyp2e1甲基化变异，改变了基因的表达。(5)在骨髓，对于所筛选的8个凋亡相关基因中，发现Bcl2L13、Survivin、Aif表达改变，但经SequenomMassARRAY方法分析，明确了三个基因启动子的CpG岛的甲基化状态，平均甲基化水平未受苯暴露的影响，但个别CpG位点的甲基化率呈现组间差别。(6)体外实验对印迹基因Igf2和H19的研究发现，染毒导致两基因表达的一致性升高，但共用的表达调控区的甲基化状态并未发生变化。(7)对于亚慢性苯暴露小鼠的精子活性进行了实验观察，结果发现，即使在低浓度暴露，也可造成小鼠精子活力下降。提示低浓度苯暴露对雄(男)性生殖系统的损害作用值得关注。总之，通过该研究概括了解了苯暴露对全基因甲基化水平、DNA甲基化转移酶的表达、对部分癌症相关基因、代谢相关基因、凋亡相关基因、印迹基因等的表达和甲基化状态的作用，以及对精子活力的影响。项目基本完成了申请书的计划研究内容，并有一定的延伸和扩展。此外，依托该项目培养了4名硕士研究生，已发表4篇论文，已投稿和正在准备的手稿也将会陆续发表。